拟南芥遗传转化
Ø背景说明
拟南芥（Arabidopsis thaliana）与油菜、萝卜、卷心菜等同为十字花科植物，又名鼠耳芥、阿拉伯芥、阿拉伯草，广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究，是一种典型的模式植物。拟南芥植株较小、生长周期短（从发芽到开花约4-6周）、结实多（每株可产生数干粒种子）、具有明显的形态特征（利于突变体表型的观察）、基因组较小、遗传操作简便。经过不断的实践，浸花法（floral tip）已成为拟南芥遗传转化最常用的方法。
Ø服务流程
客户下单—订单/实验材料确认—已有花序的拟南芥—农杆菌侵染花序—筛选—T0代种子—种植并筛选—检测苗—收T1代种子（可选项）—按客户需求快递转基因种子或苗
Ø服务内容及说明
以花序作为转基因受体材料，用携带目标基因载体的农杆菌侵染花序，将T-DNA插入到基因组中，使用对应抗性的抗生素对种子进行筛选，获得抗性种子T0代，继续种植收获T1代种子（可选）
Ø备注
1）客户可直接提供构建好的拟南芥转化载体，也可委托我司进行相关载体构建服务
客户提供质粒要求：
• 浓度：80-100ng/μL
• 体积：≥10μL
• 质粒无降解
注：质粒出现降解会影响后续实验，运输过程中可加冰袋或干冰避免此类问题
客户提供大肠杆菌要求：
• 大肠杆菌菌液或菌板均可。菌液：1年以内的菌液，加甘油保存；菌板：一周内活化的菌板
客户提供农杆菌要求：
• 农杆菌菌液或菌板均可。菌液：1年以内的菌液，加甘油保存；菌板：一周内活化的菌板
注：推荐客户提供质粒，大肠杆菌和农杆菌在邮寄过程中很容易发生污染
2）我司默认使用拟南芥哥伦比亚（Columbia）野生型为转化受体材料，客户如指定受体材料为突变体或其他品种，将另行协商具体服务事项
3）我司提供独立的转基因株系，以抗性基因PCR鉴定阳性结果作为结题标准；对于基因编辑苗我司提供阳性转基因株系的具体突变情况
Ø真核抗性筛选推荐
Basta>Hyg>G418
Ø可转品种
目前我司转化的比较多的主要是哥伦比亚野生型，突变体、其他品种等也可进行转化
Ø实验信息
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知，实验过程中客户可以随时登录客户管理系统查看项目实时进展情况。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看，并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁
Ø实验结题标准
阳性对照有正确的条带且阴性对照无条带
Ø实验交付结果
1）每个转化提供T0代苗或T1代种子，也可以根据客户要求提供T2、T3、T4代种子，超出部分根据实际情况进行收费；
备注：阳性苗为PCR阳性鉴定株系（真核抗性基因）
①胶图：白底胶图，条带单一，无杂带。阳性菌亮，阴性苗与阴性水不亮，阳性苗与阳性菌条带一致，检测苗子棵数正确。
②检测表格完整：包含检测编号，阳性苗编号，阳性总数，阳性率
③检测引物、载体序列等信息完整。
2）实验数据及图片
3）该项目的实验报告
Ø案例展示
